Ключова різниця - проточна цитометрія проти FACS

У контексті клітинної теорії клітини є основною структурною та функціональною одиницею всіх живих організмів. Сортування клітин - це методологія, яка використовується для поділу різних клітин відповідно до фізіологічних та морфологічних особливостей. Вони можуть мати внутрішньоклітинні або позаклітинні характеристики. Взаємодія ДНК, РНК та білків розглядаються як внутрішньоклітинні інтерактивні властивості, а форма, розмір та різні поверхневі білки розглядаються як позаклітинні властивості. У сучасній науці методології сортування клітин сприяли різному дослідженню в біологічних дослідженнях, а також у встановленні нових принципів за допомогою досліджень медицини. Сортування клітин відбувається за різними методологіями, які включають як примітивні з меншим обладнанням, так і передові технологічні методології з використанням складних механізмів. Проточна цитометрія, сортування клітин з флуоресцентною активацією (FACS), селекція магнітних клітин та сортування одноклітин є основними методами, що використовуються. Проточна цитометрія та FACS розроблені для диференціації клітин за оптичними властивостями. FACS - це спеціалізований тип проточної цитометрії. Проточна цитометрія - це методологія, яка використовується при аналізі гетерогенної популяції клітин відповідно до різних молекул поверхні клітин, розмір і об'єм яких дозволяє досліджувати поодинокі клітини. FACS - це процес, за допомогою якого зразкова суміш клітин сортується за характеристиками розсіювання світла та флуоресценції у дві чи більше ємності. Це ключова відмінність проточної цитометрії від FACS.

ЗМІСТ

1. Огляд та ключова різниця 2. Що таке проточна цитометрія 3. Що таке FACS 4. Подібність між проточною цитометрією та FACS 5. Побічне порівняння - проточна цитометрія та FACS у табличній формі 6. Підсумок

Що таке проточна цитометрія?

Проточна цитометрія - це метод, який використовується для дослідження та визначення експресії внутрішньоклітинних молекул та клітинної поверхні та для визначення та характеристики різних типів клітин. Він також використовується для визначення об'єму та розміру клітин та для оцінки чистоти субпопуляцій, які виділяються. Це дозволяє багатопараметричну оцінку одиничних комірок приблизно в один і той же час. Проточна цитометрія використовується для вимірювання інтенсивності флуоресценції, яка виробляється завдяки флуоресцентно міченим антитілам, які допомагають ідентифікувати білки або ліганди, що зв'язуються з асоційованими клітинами.

Як правило, проточна цитометрія включає переважно три підсистеми. Це флюїди, електроніка та оптика. У проточній цитометрії доступні п'ять основних компонентів, які використовуються при сортуванні клітин. Вони являють собою проточну клітинку (потік рідини, яка використовується для їх транспортування та вирівнювання осередків для оптичного зондування), система вимірювань (може бути різних систем, включаючи ртутні та ксенонові лампи, водяне охолодження з високою потужністю або лазери з повітряним охолодженням з низькою потужністю або діодні лазери), АЦП; Система аналого-цифрового перетворювача, система підсилення та комп'ютер для аналізу. Збір - це процес, за допомогою якого дані збирають із зразків за допомогою проточного цитометра. Цей процес опосередковується комп'ютером, який пов'язаний з проточним цитометром. Програмне забезпечення, присутнє в комп'ютері, аналізує інформацію, що подається на комп'ютер з проточного цитометра. Програмне забезпечення також має можливість регулювати параметри експерименту, керуючи проточним цитометром.

Що таке FACS?

У контексті проточної цитометрії сортування клітин, активоване флуоресценцією (FACS) - це метод, який використовується для диференціювання та сортування зразка суміші біологічних клітин. Клітини відокремлені від двох або більше контейнерів. Метод сортування заснований на фізичних особливостях клітини, що включає характеристики розсіювання світла та флуоресценції клітини. Це важливий науковий прийом, який може бути використаний для отримання надійних кількісних та якісних результатів сигналів флуоресценції, які випромінюються з кожної клітини. Під час FACS спочатку отримують попередньо отриману суміш клітин; суспензія спрямована до центру вузького потоку рідини, який швидко тече. Потік рідини розроблений для того, щоб відокремити клітини в суспензії виходячи з діаметра кожної клітини. Механізм вібрації застосовується до потоку суспензії, що призводить до утворення окремих крапель.

Система відкалібрована для того, щоб створити одну краплю з однією коміркою. Незадовго до утворення крапель потокова суспензія рухається вздовж апарату для вимірювання флуоресценції, який виявляє характерну для кожної клітини флуоресценцію. У точці утворення крапель розміщується електричне зарядне кільце, яке заряджається до кільця до вимірювання інтенсивності флуоресценції. Як тільки краплі утворюються з потоку суспензії, всередину крапель потрапляє заряд, який потім потрапляє в електростатичну систему відхилення. Відповідно до заряду система переносить краплі в різні контейнери. Спосіб застосування заряду змінюється залежно від різних систем, що використовуються в FACS. Обладнання, яке використовується в FACS, відоме як сортувальник клітин, що активується флуоресценцією.

Яка схожість між проточною цитометрією та FACS?


  • Проточна цитометрія та FACS розроблені для диференціації клітин за оптичними властивостями.

Яка різниця між проточною цитометрією та FACS?

Підсумок - проточна цитометрія проти FACS

Клітина є основною структурною та функціональною одиницею всіх живих організмів. Сортування клітин - це процес, за допомогою якого клітини виділяються та диференціюються в різні категорії на основі їх внутрішньоклітинних та позаклітинних властивостей. Проточна цитометрія та FACS - дві важливі методики сортування клітин. Обидва процеси розроблені для диференціації клітин за їх оптичними властивостями. Проточна цитометрія - це методологія, яка використовується при аналізі гетерогенної популяції клітин відповідно до різних молекул поверхні клітин, розмір і об'єм яких дозволяє досліджувати поодинокі клітини. FACS - це процес, за допомогою якого зразкова суміш клітин сортується за характеристиками розсіювання світла та флуоресценції у дві чи більше ємності. Це різниця між проточною цитометрією та FACS.

Завантажте PDF версію Flow Cytometry vs FACS

Ви можете завантажити PDF-версію цієї статті та використовувати її в офлайн-цілях відповідно до примітки. Завантажте тут версію PDF тут Різниця між проточною цитометрією та FACS

Довідка:

  1. Проточна цитометрія (FCM) / FACS | Сортування клітин, активоване флуоресценцією (FACS). Доступ 22 вересня 2017 року. Тут доступні Ібрагім, Шерріф Ф. та Гер ван ден Енг. "Проточна цитометрія та сортування клітин". SpringerLink, Springer, Берлін, Гейдельберг, 1 січня 1970. Доступно 22 вересня 2017. Доступно тут

Надано зображення:


  1. «Цитометр» від «Кірано» - власна робота, (CC BY 3.0) через Вікімедію «Сортування клітин з флюоресценцією за допомогою флуоресценції (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Розробка системи in vitro для вивчення взаємодії Equus caballus IgE з його високоафіційним рецептором FcεRI (кандидатська дисертація), Шеффілдський університет, (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia